Toxicologie in vitro

Les méthodes alternatives à l’expérimentation animale , également appelées NAMs (New Approach Methodology / Non-Animal Alternative Methods) ont pris une importance considérable au cours des dernières décennies. Elles ont trouvé leur place dans la législation communément appelée principe des 3R - remplacement, réduction et raffinement de l'expérimentation animale.

Le règlement REACH (CE n° 1907/2006) de 2006 exige que les essais sur les animaux vertébrés aux fins de REACH ne soient entrepris qu'en dernier recours. En 2003, la 7^èmemodification de la directive sur les Cosmétiques" (DIRECTIVE 2003/15/CE) stipulait une interdiction de l'expérimentation animale pour les cosmétiques, qui est entrée en vigueur en 2013.

Le Laboratoire de référence de l'Union européenne pour les alternatives à l'expérimentation animale / Centre européen pour la validation des méthodes alternatives (CEVMA) a été créé et un certain nombre de lignes directrices de l'OCDE ont été élaborées afin de fournir des normes fiables et scientifiquement satisfaisantes pour les essais in vitro. Les essais sur modèles de peau ou sur cornée bovine pour évaluer les risques de corrosion et d'irritation cutanée et oculaire en sont un exemple.

Pour un processus complexe comme la sensibilisation cutanée, un seul essai n'est pas suffisant. La combinaison de deux études in vitro et d'un test in chemico conduit à la classification du potentiel de sensibilisaion cutanée à l'aide d'une approche définie, ou AD. Ces études ciblent trois événements clés différents dans une voie toxicologique d'effets indésirables (AOP), et deux résultats concordants conduisent à la classification comme sensibilisant cutané ou non-sensibilisant (catégorie SGH ONU 1 ou NC concernant le danger H317). De plus, la nouvelle norme OCDE 497 fournit une stratégie d’essai intégrée (ITS) basée sur ces études et sur la prédiction in silico (par exemple, QSAR ou base de données DEREK Nexus) et permet la catégorisation de la puissance en sous-catégories 1A (forte) et 1B (sensibilisants cutanés modérés à faibles) du SGH ONU.

Tests de toxicité cutanée *in vitro*
Ligne Directrice	Description
OCDE 431	Corrosion cutanée : "In Vitro Skin Corrosion: Reconstructed Human Epidermis Test Method"
OCDE 435	Corrosion cutanée : "In Vitro Membrane Barrier Test Method for Skin Corrosion" (Corrositex)
OCDE 439	Irritation cutanée : "In Vitro Skin Irritation: Reconstructed Human Epidermis Test Method"

Tests de toxicité oculaire *in vitro*
Ligne Directrice	Description
OCDE 437	Corrosion et forte irritation de l’oeil : "Bovine Corneal Opacity and Permeability Test Method for Identifying i) Chemicals Inducing Serious Eye Damage and ii) Chemicals Not Requiring Classification for Eye Irritation or Serious Eye Damage" (BCOP)
OCDE 492	Irritation oculaire : EpiOcular^TM Irritation
OCDE 492B	Irritation oculaire/corrosion de l’oeil : “Reconstructed Human Cornea-like Epithelium (RhCE) Test Method for Eye Hazard Identification” (SkinEthic™)

Sensibilisation cutanée *in vitro*
Ligne Directrice	Description
OCDE 442C	DPRA - Sensibilisation cutanée in chemico : Essai de liaison directe sur la réactivité peptidique
OCDE 442D	KeratinoSens - Sensibilisation cutanée in vitro : Essai ARE-Nrf2 Luciferase
OCDE 442E	h-CLAT - Sensibilisation cutanée in vitro : Test d’activation de la lignée cellulaire humaine
OCDE 497	Approches définies pour la sensibilsation cutanée